人25羥基維生素D(25-OH-D)ELISA試劑盒實驗目的

　　本試劑僅供研究使用

　　目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中25羥基維生素D(25-OH-D)的含量。

　　實驗原理：

　　本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人25羥基維生素D(25-OH-D)水平。用純化的抗D(25-OH-D)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入人25羥基維生素D(25-OH-D)，再與HRP標記的25-OH-D抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的25羥基維生素D(25-OH-D)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣品中人25羥基維生素D(25-OH-D)濃度。

　　2-8℃保存

　　計算：

　　以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

　　試劑盒性能：

　　1.樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。

　　2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%

　　保存條件及有效期：

　　1.試劑盒保存：;2-8℃。

　　2.有效期：6個月

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