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本生快訊:ELISA試劑盒的儲存方法及實驗注意事項
ELISA試劑盒:準備與貯存
ELISA試劑盒收到后立即貯存于2-8℃下,效期見試劑盒標簽;所有成分在2-8℃下可保存至有效期。使用前,所有試劑平衡至室溫,不同批次的試劑不能交換使用。
1. 包被板,96孔,包被了抗人胎球蛋白A抗體;微孔板固定于板架上,密封于含有干燥劑的鋁箔密封袋內(nèi);貯存于2-8℃至有效期。
2. 胎球蛋白A示蹤抗體,1瓶,0.6 ml,濃縮,HRP標記的抗人胎球蛋白A示蹤抗體溶于穩(wěn)定的蛋白基質(zhì)中;此試劑使用前需用示蹤劑抗體稀釋液進行稀釋;貯存于2-8℃至有效期。
3. 示蹤抗體稀釋液,1瓶,11ml,即用,Trizma鹽酸溶于緩沖液;根據(jù)實驗步驟用于示蹤抗體稀釋;貯存于2-8℃至有效期。
4. 試驗緩沖液,濃縮,1瓶,11ml,含牛血清白蛋白的磷酸緩沖鹽;建議使用前以1:10比例用雙蒸水稀釋(如11 ml濃縮+99 ml的雙蒸水);貯存于2-8℃至有效期。
5. 洗滌液,濃縮,1瓶,20ml,30倍濃縮;試驗前需用580ml的雙蒸水稀釋,混勻;一旦稀釋,不含疊氮化物防腐劑的磷酸緩沖鹽洗滌液會含表面活性劑;稀釋的洗滌液在室溫下可保存至效期。
6. HRP底物液;1瓶,12ml,含過氧化氫的TMB底物液;貯存于2-8℃至有效期。
7. 終止液,1瓶,12ml,0.5M硫酸,貯存于2-8℃至有效期。
8. 胎球蛋白A標準品,5瓶,含胎球蛋白A,不含疊氮化物防腐劑的液態(tài)牛血清基質(zhì);各標準品濃度見瓶子標簽;3次凍存周期使用后,所有標準品保存至-20℃或更低。
9. 胎球蛋白A質(zhì)控,2瓶,含人胎球蛋白A,不含疊氮化物防腐劑的液態(tài)牛血清基質(zhì),各質(zhì)控的精確濃度范圍見瓶子標簽,3次凍存周期使用后質(zhì)控保存至-20℃或更低。
保存——如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
ELISA試劑盒實驗注意事項
為保證測定結(jié)果的準確性,請按下列良好實驗室操作規(guī)范(GLP)進行實驗
1.要經(jīng)常檢查酶標儀和微量移液器的精度和準確度。
2.使用前,試劑儲存在2 - 8℃。
3.在進行分析操作之前,請將所有的試劑回溫到室溫(20 - 25℃)。
4.所有的試劑在使用前,通過輕輕地翻轉(zhuǎn)搖動進行充分的混合,但不要引起泡沫。
5.實驗開始,所有的操作步驟應(yīng)該在規(guī)定的時間內(nèi)完成,不要中斷或超時。
6.實驗過程中注意保證溫度(20 - 25℃)。
7.不要將不同批次的試劑混用,不要使用過期的試劑。
8.每個樣品只能用自己的吸頭,不能混用,防止交叉污染。
9.所有的樣品和標準物必須同時使用,所有的試驗條件保持一致。
10.按照實驗所需的量取用試劑,未用完的試劑不要倒回原瓶中。
11.所有的試劑瓶操作完成后立即蓋好蓋,不要將不同試劑瓶的蓋混用。
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