知識講解：培養(yǎng)基保存條件及相關滅菌的有關問題
 

　　培養(yǎng)基的保存條件：

　　1.建議按照產(chǎn)品說明書的要求放置在推薦的儲存條件。

　　2.干粉培養(yǎng)基：即使能一定程度上抵御光和濕度，但是建議客戶還是存放在干燥避光的環(huán)境。干粉的最佳儲存溫度是15-25 °C (59-77 °F)。長時間存放導致的pH值變化可能通過酸堿調(diào)節(jié)。干粉培養(yǎng)基是容易吸濕的，所以瓶蓋應該盡量保持蓋緊。吸水后的干粉可能導致pH變化并且結塊。明顯結塊且不易用藥匙壓碎的干粉培養(yǎng)基不建議繼續(xù)使用，因為內(nèi)部化學成分可能發(fā)生變化。

　　3. 對于配好的培養(yǎng)基，溫度是4-12°C且避光保存。裝在密閉容器或密封袋中避免污染和水分流失。含有血、蛋黃等高營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基應該放在2-8°C 存放。放入密閉容器前的平板需要保持干燥并且溫度不能太高。否則在密閉容器中產(chǎn)生太多凝結水會導致污染。失水超過15%的瓊脂可能影響微生物生長，尤其可能影響革蘭氏陰性菌。液體培養(yǎng)基過度失水也會導致某些成分的沉淀和結晶。

　　培養(yǎng)基滅菌問題：

　　1.培養(yǎng)基的配制是否都需要高壓滅菌，多長時間比較合適?

　　培養(yǎng)基配制方法，建議首先參考產(chǎn)品說明書指示的配制、滅菌操作的指示，進行操作。

　　含有瓊脂的干粉培養(yǎng)基需要加熱煮沸，因為瓊脂的溶點在96°C左右。需要保證各成分充分混勻。熱水溶解無法代替加熱煮沸。培養(yǎng)基未煮沸狀態(tài)為渾濁，隨著加熱煮沸，顆粒溶解，培養(yǎng)基會變澄清，且不含有塊狀。一般培養(yǎng)基沸騰后，觀察到澄清，且沒有明顯的不溶塊狀或膠狀物即可。

　　有些培養(yǎng)基含有溫度敏感的成分，不能高壓滅菌，因此在操作上需要格外注意，需要參考說明書的具體操作。

　　2.已經(jīng)輻照滅菌的培養(yǎng)基還能高溫高壓再滅菌嗎?

　　已經(jīng)輻照滅菌的培養(yǎng)基，通常不建議再高溫高壓滅菌或其他加熱手段。如果無菌模擬灌裝實驗需要模擬過濾滅菌以及高溫高壓蒸汽滅菌的兩個過程，通常滅菌后的培養(yǎng)基仍然能夠提供足夠營養(yǎng)以保證微生物生長，但是強烈建議使用者在模擬過程中加測微生物促生長實驗。

　　3.干粉或顆粒培養(yǎng)基使用說明書中121℃滅菌15分鐘是指滅菌的過程時長嗎?

　　培養(yǎng)基說明書中121℃滅菌15分鐘是指高壓蒸汽滅菌法，在溫度達到121℃，持續(xù)滅菌15min。建議首先確認滅菌設備的原理為高壓蒸汽滅菌法，而且滅菌過程是符合相關滅菌效果驗證的，以確保培養(yǎng)基得到有效滅菌。

　　備注：以上信息僅供參考，具體信息說明及操作以廠家說明書為準。

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